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本试剂盒适用于将稀释的蛋白样品定量浓缩成小容量。浓缩过程简单方便，可在1小时内完成。浓缩的蛋白样品可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

浓缩方法涉及到应用试剂混合蛋白溶液，定量沉淀蛋白。沉淀后，沉淀被洗去盐和其它试剂，蛋白沉淀被悬浮在一小容量的缓冲液。本试剂盒可用于沉淀蛋白、浓缩蛋白、去除各种缓冲液杂质组分、改换缓冲液体系。适用于多种蛋白质组研究下游应用。

本试剂盒浓缩后蛋白失去活性，适用于下游应用对蛋白活性没有要求的实验。如果下游需要活性蛋白，可以选用离心法蛋白浓缩试剂盒，离心法蛋白浓缩试剂盒浓浓缩的蛋白样品保持天然构象，蛋白回收率更高。

• 在900μL待提取液体样本中加入100μL试剂A，充分混匀。
  
  • 根据实际蛋白样品量等比例调整试剂A的用量。
• 冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
  
  • 可以4℃静置过夜。
• 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。
  
  • 使用离心机能达到的最高离心力。
• 小心移除上层清液丢掉，留沉淀。
  
  • 蛋白量较少时可能很难看到沉淀。
    
  • 尽可能吸干，不要残留液体。
    
  • 离心完立即吸取上清，不要长时间放置。
    
  • 注意避免洗掉沉淀。
    
  • 可以将离心管倒扣在吸水纸上轻轻控几下，除去残余在管口的液体。
• 将离心管开口倒置在吸水纸上干燥离心管。
  
• 加1mL无水乙醇至离心管中。
  
• 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。吸除上清，留沉淀。
  
  • 尽可能吸干，不要残留液体。注意避免吸掉沉淀。
    
  • 离心完立即吸取上清，不要放置。
    
  • 可以将离心管倒扣在吸水纸上轻轻控几下，除去残余在管口的液体。
• 加入200μL试剂B到离心管中。
  
• 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。吸除上清，留沉淀。
  
  • 尽可能吸干，不要残留液体。注意避免吸掉沉淀。
    
  • 离心完立即吸取上清，不要放置。
    
  • 可以将离心管倒扣在吸水纸上轻轻控几下，除去残余在管口的液体。
• 加入200μL试剂B到离心管中。
  
• 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。吸除上清，留沉淀。
  
  • 尽可能吸干，不要残留液体。注意避免吸掉沉淀。
    
  • 离心完立即吸取上清，不要放置。
    
  • 可以将离心管倒扣在吸水纸上轻轻控几下，除去残余在管口的液体。
• 将离心管开口倒置在吸水纸上干燥离心管。
  
  • 或开盖敞口静置至液体完全干燥。
    
  • 也可将离心管置于37℃烘箱10～20分钟烘干至管底无明显液体残留。
    
  • 也可以改成室温静置或用电吹风吹干，除去管底和管壁残留液体即可。
• 沉淀中加入20～50μL 1×Loading buffer，煮10min，溶解蛋白，直接用于下游实验。或者用40～100μL试剂C溶解蛋白沉淀，充分混匀。
  
  • 根据下游实验的需要选择溶解液，不一定用试剂盒中的溶解液C。
    
  • 试剂盒中的蛋白溶解液含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用其他溶解液。也可以将最后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理或透析处理。
    
  • 部分蛋白样品通常难溶解，可以加热或者超声处理促溶。
• 在4℃，10000×g条件下离心10分钟。
  
• 收集上清用于下游实验。
  
  • 建议用BCA法进行蛋白定量。
    
  • 蛋白样品-80℃存放一年没有问题，注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。